下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．下列说法正确的是（）限制酶EamHⅠHtndⅢEcoRⅠSmaⅠ识别序列及切割位点A.一个图1

Question

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．下列说法正确的是（　　）

限制酶	EamHⅠ	HtndⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点

A. 一个图1所示的质粒子分子经Sma I切割前后，分别含有1、2个游离的磷酸基团

B. 若对图中质粒进行改造，插入的Sma I酶切位点越多，质粒的热稳定性越低

C. 与只使用EcoRI 相比较，使用BamHI 和HindIII两种限制酶同时处理质粒，外源DNA的优点在于可以防止质粒和含目的基因的DNA自身环化

D. 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在只含蔗糖的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测

Answer 1

A、质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团．从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被该酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，A错误；
B、由于SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高，B错误；
C、只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物，C正确；
D、将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选出目的基因的目的，D错误．
故选：C．