如表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．限制酶MseⅠPstⅠEcoRⅠSmaⅠXmaⅠ识别序列及切割位点（1）限

Question

如表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

限制酶	MseⅠ	PstⅠ	EcoRⅠ	SmaⅠ	XmaⅠ
识别序列及切割位点

（1）限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是___．
（2）图2中的目的基因D需要使用___剪切才能获得，因而需要对图1所示的运载体进行改造，构建新的限制酶酶切位点，试帮助完成构建过程（填括号中物质的序号）：首先用___处理质粒；然后用___处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用___处理质粒，形成相应的限制酶酶切割位点，它可被___识别．（构建需要的所有条件如下：①EcoRⅠ②MseⅠ③PstⅠ④DNA连接酶⑤DNA聚合酶）
（3）检测筛选是一个重要步骤，图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法，以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌，培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有___和___．从筛选结果分析，含目的基因的是___（填图中编号）菌落中的细菌．

Answer 1

（1）分析表格可知，限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的切割位点不同．（2）分析图解可知，图2中的目的基因D需要使用MetⅠ和PstⅠ剪切才能获得，因而需要对图1所示的运载体进行改造，对质粒改造使，需构建新的限制酶酶切位点...