如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割为点相同的酶不重复标注．请回答下列问题：限制酶BamHⅠBdⅠSau3AⅠGindⅢ识

Question

如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割为点相同的酶不重复标注．请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BdⅠ	Sau3AⅠ	GindⅢ
识别序列及切割位点

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用___两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过___酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将其转入处于___态的大肠杆菌．若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得___种大小不同的DNA片段．
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加___，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中___．
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端与BelⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为___对于该部位，这两种酶___（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开．

Answer 1

（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的启动子丢失，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割．酶切后的载体和目的基因片段，通过连接酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将...