萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐热，在70℃条件下15min后失活．实验材料：萌发3天的小

Question

萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶．α-淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活，而β-淀粉酶不耐热，在70℃条件下15min后失活．实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）．
主要试剂及仪器：麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等．
实验步骤：
步骤一：制作麦芽糖梯度液．取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2min，取出后按试管号顺序排列．

试剂	试管号
	1	2	3	4	5	6	7
麦芽糖标准液（mL）	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸馏水（mL）	2.0	1.8	1.4	1.0	X	Y	Z
斐林试剂（mL）	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

步骤二：萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液．
步骤三：将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，取出后迅速冷却．
步骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5mL 5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液（忽略其中含有的少量麦芽糖）和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min．
步骤五：取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管，然后向E、F试管分别加入______，最后______，观察颜色变化．
结果分析：将E试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准液进行比较，获得该试管中麦芽糖浓度，并计算出α-淀粉酶催化效率．
请分析回答：
（1）本实验的目的是测定______．
（2）步骤一的6试管中加入蒸馏水的量（Y）是______ （单位mL）．
（3）实验中B试管所起的具体作用是______．
（4）请补全步骤五的做法______，______．
（5）若要测定另一种淀粉酶的活性，则需在步骤______进行改变．

Answer 1

（1）β-淀粉酶不耐热，在70℃条件下15min后失活，而本实验的步骤三中，将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，这样β-淀粉酶已经失活，但α-淀粉酶较耐热，仍具有生物活性，所以本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率．
（2）实验设计要遵循单一变量原则，所以为了保证各试管中试剂量相等，步骤一的6试管中加入蒸馏水的量（Y）是0.4，使试剂量为2．
（3）斐林试剂能与还原糖溶液产生砖红色沉淀，所以实验中B试管所起的具体作用是检测使用的淀粉液中是否有还原糖．
（4）根据图表可知，向E、F试管分别加入的是2 mL斐林试剂，并在60℃水浴条件下加热2 min．
（5）因为酶具有专一性，所以要测定另一种淀粉酶的活性，则需在步骤三中加入不同的酶．
故答案为：
（1）小麦种子中α-淀粉酶催化效率
（2）0.4
（3）检测使用的淀粉液中是否有还原糖
（4）2 mL斐林试剂        60℃水浴加热2 min     
（5）三