细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里,但是没有立刻放-80……细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里（之前一直放4度的）,但是没有立刻放-80……室温下呆了2小时,会有事儿吗?用8%的DMSO冻的.

Question

细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里,但是没有立刻放-80……
细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里（之前一直放4度的）,但是没有立刻放-80……室温下呆了2小时,会有事儿吗?用8%的DMSO冻的.
我脑子进水了...还求各位大大讲讲经验

Answer 1

会有些影响,在活率方面.70%的细胞应该没问题.
1）传统方法: 冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h
(或隔夜)--->液氮中长期储存.
注意：-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些.
（2）程序降温：利用已设定程序的程序降温仪以-1～-3℃/min的速度由室温降至（-80℃以下）-120℃,再放在液氮中长期储存.