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细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里,但是没有立刻放-80……细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里(之前一直放4度的),但是没有立刻放-80……室温下呆了2小时,会有事儿吗?用8%的DMSO冻的.
题目详情
细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里,但是没有立刻放-80……
细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里(之前一直放4度的),但是没有立刻放-80……室温下呆了2小时,会有事儿吗?用8%的DMSO冻的.
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▼优质解答
答案和解析
会有些影响,在活率方面.70%的细胞应该没问题.
1)传统方法:冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16~18h
(或隔夜)--->液氮中长期储存.
注意:-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些.
(2)程序降温:利用已设定程序的程序降温仪以-1~-3℃/min的速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮中长期储存.
1)传统方法:冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16~18h
(或隔夜)--->液氮中长期储存.
注意:-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些.
(2)程序降温:利用已设定程序的程序降温仪以-1~-3℃/min的速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮中长期储存.
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