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某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验.通过查阅资料,制订了以下的实验方案:实验课题酵母RNA的提取和鉴定实验目的1.从酵母中提
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某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验.通过查阅资料,制订了以下的实验方案:
【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定
【实验目的】1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA.
【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离.RNA不溶于乙醇和无水乙醚.RNA热稳定性较蛋白质强.利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA.RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色.
【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等.
【实验步骤】
①称6克干酵母
②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴
③离心10分钟后取上清液
④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟
⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次
⑥获得RNA粗制品
⑦RNA鉴定
请根据实验方案,思考并回答下列问题:
(1)酵母菌细胞中的RNA主要分布在___中.酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是___.
(2)实验步骤⑤中,离心后取___(填“上清液”或“沉淀物”)用乙醇、无水乙醚进行洗涤.
(3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是___;
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是___,二是___,以便获得更多更纯净的RNA.
(5)若用花椰菜来提取DNA,可用___瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要___.
【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定
【实验目的】1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA.
【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离.RNA不溶于乙醇和无水乙醚.RNA热稳定性较蛋白质强.利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA.RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色.
【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等.
【实验步骤】
①称6克干酵母
②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴
③离心10分钟后取上清液
④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟
⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次
⑥获得RNA粗制品
⑦RNA鉴定
请根据实验方案,思考并回答下列问题:
(1)酵母菌细胞中的RNA主要分布在___中.酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是___.
(2)实验步骤⑤中,离心后取___(填“上清液”或“沉淀物”)用乙醇、无水乙醚进行洗涤.
(3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是___;
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是___,二是___,以便获得更多更纯净的RNA.
(5)若用花椰菜来提取DNA,可用___瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要___.
▼优质解答
答案和解析
(1)酵母菌中含有RNA的结构有细胞核、核糖体(蛋白质和RNA构成)、线粒体、细胞质基质(RNA主要存在于细胞质中).酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧型,所以是用来研究细胞呼吸不同方式的好材料.
(2)因为RNA不溶于乙醇和无水乙醚,所以实验步骤⑤中,离心后取沉淀物(RNA)用乙醇、无水乙醚进行洗涤.
(3)分解核酸的酶在20~70℃温度范围内活性高,会使RNA降解,所以RNA提取过程中不能在此温度范围内停留的时间不能太长.
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴进行,因为高温会使杂质蛋白质变性,同时使核酸水解酶失活,减少RNA的分解,这样会获得更多、更纯净的RNA.
(5)用植物细胞取DNA时需要研磨,但是研磨要缓慢;还需要进入洗涤剂以瓦解细胞膜.
故答案为:
(1)细胞质 酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧型
(2)沉淀物
(3)分解核酸的酶在此温度范围内活性高,会使RNA降解
(4)使杂质蛋白质变性 使核酸水解酶失活,减少RNA的分解
(5)洗涤剂 缓慢
(2)因为RNA不溶于乙醇和无水乙醚,所以实验步骤⑤中,离心后取沉淀物(RNA)用乙醇、无水乙醚进行洗涤.
(3)分解核酸的酶在20~70℃温度范围内活性高,会使RNA降解,所以RNA提取过程中不能在此温度范围内停留的时间不能太长.
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴进行,因为高温会使杂质蛋白质变性,同时使核酸水解酶失活,减少RNA的分解,这样会获得更多、更纯净的RNA.
(5)用植物细胞取DNA时需要研磨,但是研磨要缓慢;还需要进入洗涤剂以瓦解细胞膜.
故答案为:
(1)细胞质 酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧型
(2)沉淀物
(3)分解核酸的酶在此温度范围内活性高,会使RNA降解
(4)使杂质蛋白质变性 使核酸水解酶失活,减少RNA的分解
(5)洗涤剂 缓慢
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