在做含量检验方法验证的时候,HPLC的检测限是信噪比3,通过测定噪音峰峰高与样品峰峰高的的比值,是用什么样品?对照品还是样品?进多少针为好?

Question

在做含量检验方法验证的时候,HPLC的检测限是信噪比3,
通过测定噪音峰峰高与样品峰峰高的的比值,是用什么样品?对照品还是样品?进多少针为好?

Answer 1

问题1：做方法学要用标准品（对照品）,尤其是对于主成分.对于杂质,可能没有标准品,那么可以用自制对照品,但其色谱纯度不能低于98%.
问题2：检测限和定量限（10倍基线噪音）可以一起做,通过稀释定量限样品,将定量限样品稀释2倍、3倍、4倍、5倍（这四个浓度中通常会有一个合适的）,检测限不要求多针进样,进一针即可.
其他：agilent、waters的工作站可以自动给出信噪比,三倍基限噪音只是个近似值,对于不带自动检测信噪比的工作站,差不多就可以.
对于自动进样的仪器,还有个偷懒的办法,就是设置进样量,通过改变进样量来计算检测限.例如你定量限进样量是20ul,那么你先进一个5ul的看看,如果不行再进4ul或者是6ul.