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为什么做pcr和测序用的引物不一样
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为什么做pcr和测序用的引物不一样
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答案和解析
pcr引物和测序引物是可以通用的,最多是纯化方式不一样,测序的要求高一些.
最重要的是,pcr扩增是从引物开始的,而测序一般要从引物下游几十个bp以后,信号才逐渐稳定,能够读出来.所以拿pcr引物去测序,那只能测出引物下游几十个bp以后的片段,这样你pcr的片段就会测不全.故而需要重新设计测序引物,一般要在所测片段的上游一些.
最重要的是,pcr扩增是从引物开始的,而测序一般要从引物下游几十个bp以后,信号才逐渐稳定,能够读出来.所以拿pcr引物去测序,那只能测出引物下游几十个bp以后的片段,这样你pcr的片段就会测不全.故而需要重新设计测序引物,一般要在所测片段的上游一些.
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