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质粒提取的步骤
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质粒提取的步骤
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实验一
ApaLI (178)
P(BLA) ALPHA
质粒DNA的提取、 质粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及琼脂糖凝胶电泳
ApaLI (2367)
EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415)
APr
pUC19
BamHI (418) PstI (440)HindIII (448)
P(LAC) ORI
2686 bp
ApaLI (1121)
一 实验目的
掌握碱裂解法分离质粒DNA的基本原理和操作要点. 的基本原理和操作要点. 掌握碱裂解法分离质粒 的基本原理和操作要点 了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒 了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒DNA的试验方法 的试验方法 学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术 的方法和技术 学习琼脂糖凝胶电泳检测
二 实验原理
质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子, 质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子,具有双链共价闭环结构的DNA分子.是染色体外小型（ 200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分 DNA分子.是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分 分子 DNAcccDNA）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子. ）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子子（cccDNA）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子.
培养细菌使质粒扩增 三个基本步骤 收集和裂解细菌 分离和纯化质粒DNA 分离和纯化质粒DNA
ApaLI (178)
P(BLA) ALPHA
质粒DNA的提取、 质粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及琼脂糖凝胶电泳
ApaLI (2367)
EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415)
APr
pUC19
BamHI (418) PstI (440)HindIII (448)
P(LAC) ORI
2686 bp
ApaLI (1121)
一 实验目的
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二 实验原理
质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子, 质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子,具有双链共价闭环结构的DNA分子.是染色体外小型（ 200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分 DNA分子.是染色体外小型（1-200kb）的共价、闭合、环状的双链DNA分 分子 DNAcccDNA）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子. ）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子子（cccDNA）,能自主复制并能稳定遗传的遗传因子.
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