国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×106．为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准，某兴趣小组进行了如下实验，请回答下列问题：（1）制备培养基：培养基的

Question

国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×10⁶．为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准，某兴趣小组进行了如下实验，请回答下列问题：
（1）制备培养基：培养基的碳源为___（填“含碳无机物”或“含碳有机物”）．检测培养基灭菌是否合格的方法是___．
（2）样品稀释：先将样品稀释10倍，可用无菌移液管吸取25mL酸奶样品加入盛有___mL无菌水的三角瓶中，使样品与水充分混匀．然后进行系列稀释操作，得到稀释至10⁶、10⁷、10⁸倍的样品．
（3）培养与统计：吸取不同稀释度的样品各1mL，分别置于不同培养皿内，加入适宜温度的溶化状态的培养基，使之混合均匀，冷却成平板．每个稀释度做3个重复．在适宜条件下培养一段时间后，对平板的菌落数进行统计，结果如表：

稀释度（倍）	106			107			108
平板	1	2	3	1	2	3	1	2	3
平板菌落数（个）	432	421	445	78	67	74	9	6	8

为了保证结果准确，应选择上述稀释度为___倍的平板菌落数作为统计结果，计算出样品中每毫升乳酸菌数为___．
（4）测定微生物的数量常采用稀释涂布平板法，其统计的数值往往比实际数目___，原因是___．

Answer 1

（1）根据题意可知，该实验目的为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达标，而乳酸菌属于异养型生物，因此培养基的碳源为含碳有机物．检测培养基灭菌是否合格，可取若干灭菌后未接种的培养基（或空白平板）培养一段时间，观察是否有菌落生长．
（2）先将样品稀释10倍，即酸奶样品体积：无菌水体积=1：9，即可用无菌移液管吸取25mL酸奶样品加入盛有25×9=225mL无菌水的三角瓶中，使样品与水充分混匀．
（3）稀释涂布平板法进行计数时，应选择30-300的菌落数进行计数，因此应选择上述稀释度为10⁷倍的平板菌落数作为统计结果，计算出样品中每毫升乳酸菌数=（78+67+74）÷3×10⁷=7.3×10⁸．
（4）测定微生物的数量常采用稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起，观察到的只是一个菌落，因此其统计的数值往往比实际数目低．
故答案为：
（1）含碳有机物    取若干灭菌后未接种的培养基（或空白平板）培养一段时间，观察是否有菌落生长
（2）225
（3）10⁷        7.3×10⁸
（4）低    两个或多个细胞连在一起，观察到的只是一个菌落