2010江苏高考题27题（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止▲。答案：只使用EcoRI，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同

Question

2010江苏高考题27题（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 ▲ 。
答案：
只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生
质粒和目的基因自身连接物，而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。
但我觉得这答案有明显缺陷，我思考了很久，有两个不同末端的目的基因，并不能达到防止自身连接的目的，2个目的基因中的其中一个倒转180就可以和另一个连接，也没有链方向问题，不信可以自己拿笔画一下，希望高手帮帮忙

Answer 1

对于这个问题提问者考虑的很周到，但2个目的基因是不能连在一起，所以.........这是审题方向的........但这中精神是我们所要学习的！难到在实际操作中2个目的基因是不能连在一起吗？我们这些没实际操作的学生不得而知....