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各位同仁,我做的SYBR GREEN实时定量PCR,怎么阴性对照总是出来Ct值呢,我的阴性对照是用灭菌水做模板的
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各位同仁,我做的SYBR GREEN实时定量PCR,怎么阴性对照总是出来Ct值呢,我的阴性对照是用灭菌水做模板的
▼优质解答
答案和解析
主要看你的CT值大约是多少,如果很大（大于40循环）那么可以判定结果没有问题,如果跟目的基因的CT一致或者为其他CT值那么判断为模板造成的气溶胶污染或者其他外缘DNA造成的污染.另外你阴性对照加的是水,那么说明你做梯度稀释的时候用的也是灭菌水,这个做荧光定量试验是很不规范的,建议用专门的荧光定量稀释液去做.
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