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PCR产物酶切遇到的问题选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG 39 75 C C/AGG…… C C/TGG……pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不
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PCR产物酶切遇到的问题
选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG
39 75
C C/AGG…… C C/TGG……
pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图
较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不开怎么办啊
上边的不是引物而据一，在另一个胶上跑了pcr产物和酶切产物，pcr产物的引物二聚体与这个条带不同。
左边那个条带是另一个试验的产物，不需要考虑。
选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG
39 75
C C/AGG…… C C/TGG……
pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图
较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不开怎么办啊
上边的不是引物而据一，在另一个胶上跑了pcr产物和酶切产物，pcr产物的引物二聚体与这个条带不同。
左边那个条带是另一个试验的产物，不需要考虑。
▼优质解答
答案和解析
能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性梯度聚丙烯酰胺胶,甚至能分辨只相差一个碱基的核酸.
所以如果你一定要分清40和36bp的带,就用聚丙烯酰胺试试.
所以如果你一定要分清40和36bp的带,就用聚丙烯酰胺试试.
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