福林酚法检测可溶性蛋白质的原理注意是原理哦,越详细越好.

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福林酚法检测可溶性蛋白质的原理
注意是原理哦,越详细越好.

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答案和解析

包括两步反应：
（1）在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物.
（2）此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸（FolIn试剂）还原,混合物深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物）,颜色深浅与蛋白质含量成正比.此方法操作简便,灵敏度比双缩脲法高100倍,定量范围为5~100μg蛋白质.FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物,均有干扰作用.此方法的缺点是有蛋白质的特异性影响,即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同,标准曲线也不是严格的直线形式.

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