如图是某转基因烟草的培育过程，箭头表示相关限制酶的酶切位点．请据图分析回答：（1）目的基因可用PCR技术扩增，该技术利用原理，PCR反应体系中应加入酶．（2）已知几种限

Question

如图是某转基因烟草的培育过程，箭头表示相关限制酶的酶切位点．请据图分析回答：

（1）目的基因可用PCR技术扩增，该技术利用______原理，PCR反应体系中应加入______酶．
（2）已知几种限制酶识别序列及其切割位点如下表所示：

限制酶	BamHI	HindI	EcoRI	SmnI
识别序列及其切割位点

图中①、②过程为减少质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，并使插入片段尽可能小，应选用限制酶______对外源DNA、质粒进行切割．图中所示的质粒分子经Sma I切割后含有______个游离的磷酸集团．若需要对Sma I切割过后的末端进行连接，应使用______DNA连接酶处理．
（3）要将目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，应先用______处理农杆菌，使之转变成为感受态，以利于表达载体进入．经⑥过程形成不同的组织器官，是细胞______的结果．

Answer 1

（1）PCR技术的原理是：DNA复制，PCR反应体系中应加入热稳定DNA聚合酶．（2）限制酶SmaI位于目的基因中，用此酶切割会破坏目的基因．所以为减少质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，并使插入片段尽可能小，应选...