科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO2的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率．请回答下列问题：（1）PCR过程所依据的原理是，该

Question

科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO₂的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率．请回答下列问题：
（1）PCR过程所依据的原理是___，该过程需要加入的酶是___；利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成___．
（2）该技术不直接改造Rubisco酶，而通过Rubisco酶基因进行改造．从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是___．和传统基因工程技术相比较，定点突变最突出的优点是获得的产物一般是自然界中___（填“存在的”或“不存在的”），PCR定点突变技术属于___工程的范畴．
（3）利用定点突变改造的Rubisco酶基因，如果要用农杆菌转化法导入受体细胞，应把Rubisco酶基因插入农杆菌Ti质粒的___片段中，因为该片段具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上的特点．根据此片段这一转移并整合的特点，推测DNA片段上可能含有控制___（酶）合成的基因．

Answer 1

（1）PCR的原理是DNA双链复制；扩增过程是在较高温度下进行的，因此需要加入耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）．利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．
（2）蛋白质空间结构较复杂，改造困难；直接改造蛋白质不能遗传，改造了基因能遗传，因此不能直接改造Rubisco酶，而通过Rubisco酶基因进行改造．从而实现对Rubisco酶的改造．PCR定点突变技术属于蛋白质工程的范畴．
（3）农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上的特点，因此携带外源基因的DNA片段必须插入到T-DNA片段（内部）部位．推测DNA片段上可能含有控制Rubisco酶合成的基因．
故答案为：
（1）DNA双链复制    耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）     引物      
（2）蛋白质空间结构较复杂，改造困难；直接改造蛋白质不能遗传，改造了基因能遗传    能生产出自然界不存在的蛋白质    蛋白质工程
（3）T-DNA           Rubisco酶