生物-生物技术实践微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人

Question

【生物-生物技术实践】
微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自______的土壤．
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用______培养基．常用的接种方法____________ 和______．
（3）接种后，应密封培养的原因是______，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取______就可获得高效菌株．
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为______ 个/mL．该统计结果______ （低于、高于）实际值．

Answer 1

（1）在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集．
（2）从功能上，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）该类微生物是厌氧微生物，接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株．
（4）计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即（200+180+220）÷0.2=100个/mL．该结果会低于实际值，因为看到的是菌落数目．
故答案为：
（1）长期被石油污染（含石油多的）
（2）选择      平板划线法     稀释涂布平板法
（3）该类微生物是厌氧型     降油圈大的菌落
（4）1000     低于