研究表明：温度骤变以及秋水仙素等理化因素会使植物细胞染色体数目加倍．某同学为验证低温能诱导洋葱（2N=16）根尖细胞染色体数目加倍，开展了相关研究．请分析回答：（1）实验原理

Question

研究表明：温度骤变以及秋水仙素等理化因素会使植物细胞染色体数目加倍．某同学为验证低温能诱导洋葱（2N=16）根尖细胞染色体数目加倍，开展了相关研究．请分析回答：
（1）实验原理：______
（2）材料用具：洋葱，冰箱，______、______、______ （显微操作器材），解离液和碱性染料等．
（3）方法步骤：
A．培养洋葱根尖，待不定根长至1cm左右时，冰箱4℃下诱导培养36h；
B．制作装片（用→表示）：______
C．显微观察并绘图：该同学用在显微镜下观察到的细胞不分散，可能的原因是______．
（4）计数：若常温下的装片中，分裂期细胞占细胞总数的10%，细胞周期总时间为20h，则分裂间期经历______h；该实验中处于分裂中期的细胞含有______条染色体．

Answer 1

（1）低温处理根尖细胞，能够抑制根尖细胞有丝分裂有丝分裂前期纺锤体的形成，以致染色体不能被拉向两极，细胞也不分裂，最终导致细胞中染色体数目加倍．
（2）在实验过程中，需要制作临时装片，因此需要载玻片和盖玻片，并且需要借助于显微镜观察染色体的数目变化．
（3）临时装片制作的步骤为解离→漂洗→染色→制片．解离的目的是让细胞分离开来；漂洗是用清水洗去解离液，防止影响染色的效果；染色是用醋酸洋红或龙胆紫将细胞中的染色体进行染色；制片过程中，需要用镊子将细胞捣碎，并且利用载玻片进行压片，以保证细胞分散开来．如果该同学用在显微镜下观察到的细胞不分散，可能是解离不充分或未用镊子捣碎或制片完成后未充分压片．
（4）若常温下的装片中，分裂期细胞占细胞总数的10%，则分裂间期占90%．细胞周期总时间为20h，则分裂间期=20×90%=18h；由于洋葱体细胞数为16，未发生加倍的细胞的染色体数目仍为16，而染色体数目加倍后的细胞为32条染色体．
故答案为：
（1）低温处理根尖细胞，能够抑制根尖细胞有丝分裂有丝分裂前期纺锤体的形成，以致染色体不能被拉向两极，细胞也不分裂
（2）显微镜、盖玻片、载玻片
（3）解离→漂洗→染色→制片     解离不充分；未用镊子捣碎；制片完成后未充分压片
（4）18    16或32