我国一科研团队将荒漠植物TaNHX2基因转移到普那菊莴苣细胞内，获得了转基因耐盐普那菊莴苣新品种．回答下列有关问题：（1）为保证目的基因在普那菊莴苣细胞中能够表达，运载体上应含

Question

我国一科研团队将荒漠植物TaNHX2基因转移到普那菊莴苣细胞内，获得了转基因耐盐普那菊莴苣新品种．回答下列有关问题：
（1）为保证目的基因在普那菊莴苣细胞中能够表达，运载体上应含有特定的___（复制原点、启动子、标记基因）
（2）将普那菊莴苣幼胚接种到诱导培养基上，经过___过程，培养出愈伤组织，然后用___法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上．
（3）为验证外源基因整合到普那菊莴苣基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所用mRNA并反转录成___，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异性引物，通过___方法进行基因扩增．若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明___．
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照．培养30天后观察现象，若___则说明转基因植株获得了耐盐特性．

Answer 1

（1）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．因此为保证目的基因在普那菊莴苣细胞中能够表达，运载体上应含有特定的启动子．
（2）普那菊莴苣幼胚是高度分化的结构，需要经过脱分化过程形成愈伤组织；因为农杆菌感染植物细胞时，农杆菌Ti质粒的T-DNA可以整合到植物细胞的染色体DNA上，因此用农杆菌转化法，将目的基因导入植物细胞中．
（3）以mRNA为模板，反转录成cDNA（互补DNA），接着形成双链DNA分子．体外扩增DNA分子常采用PCR技术．若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录．
（4）转基因植株中含有TaNHX2基因，具有耐盐特性．与非转基因幼苗作为对照，如果转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，存活率高于非转基因幼苗，则说明转基因植株获得了耐盐特性．
故答案为：
（1）启动子
（2）脱分化   农杆菌转化法
（3）cDNA（互补DNA）      PCR        目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录
（4）转基因幼苗的存活率高于非转基因幼苗