20.(2014.湖北黄同中学期中)(16分)1952年“噬菌体小组”的赫尔希和蔡斯研究了噬菌体的蛋白质和DNA在侵染过程中的功能,请回答下列有关问题:(1)如何获得被32P和35S标记的噬菌体?。(2)用
20. (2014 .湖北黄同中学期中) (16分) 1952年“噬菌体小组”的赫尔希和蔡斯研 究了噬菌体的蛋白质和DNA在侵染过程中的功能,请回答下列有关问题:
(1) 如何获得被32P和35S标记的噬菌体?。
(2) 用标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌。一段时间后 用搅拌器搅拌,然后 离心得到上清液和沉淀物。检测上清液中的放射性 得到如图所示的实验结果。 搅拌的目的是 ,所以搅拌时间应至少大于 min 否则上清液中的放射性较低。当搅拌时间足够长时,上清液中的35 S和32P分别占初始标记噬菌体放射性的80%和30%,说明 ;但上清液中32P的放射性仍达到30%,其原因可能是。图中“被侵染细菌”的存活率曲线的意义是作为对照,如果明显低于100%,则上清液放射性物质32P的含量会 。
(3) 32P标记的某一个噬菌体侵染未标记的大肠杆菌,最后产生100个子代噬菌体。子代噬菌体的DNA含有的P元素为 ,其形成的噬菌体的比例为 。
20. (16分,每空2分)
(1) 用含32P和35S的培 养基分别培养大肠杆菌,再用噬菌体分别 侵染被32P和35S标记的大肠杆菌
(2) 使噬菌体和细菌分离1. 5 DNA进 人细菌,蛋白质没有进人细菌部分噬菌 体未侵染进人细菌增高
(3) 31P、32P 50 : 1(或32P、31P 1 : 50)
解析:(1) 噬菌体只能寄生在活的细胞中, 不能用普通培养基培养,所以,要获得被32 P和35S标记的噬菌体,先用含32P和35S的 培养基分别培养大肠杆菌,再用噬菌体分 别侵染被32 P和35 S标记的大肠杆菌。
(2) 用标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆 菌。一段时间后,搅拌、离心得到上清液和 沉淀物。搅拌的目的是使噬菌体和细菌分 离。从图中看出,搅拌时间大于1. 5 min 上清液中的放射性较高。当搅拌时间足够 长时,上清液中的35 S和32 P分别占初始标 记噬菌体放射性的80%和30% 说明 DNA进入细菌,蛋白质没有进入细菌。上 清液中仍有少量32P的放射性,主要原因 是部分噬菌体未侵染进人细菌。如果时间 过长,被侵染的细菌破裂,会释放出噬菌 体,上清液放射性物质32P的含量会增高。
(3) 由于半保留复制,最初被标记的两条链 只参与形成两个DNA分子,100个子代噬 菌体中,只有两个是含有标记链的。
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