科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问

Question

科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用________酶，所需的原料是________。

(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表)：

限制酶	BamHⅠ	Hind  Ⅲ	EcoR  Ⅰ	Sma  Ⅰ
识别序列及 切割位点

用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用Sma  Ⅰ酶切割，原因是

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________。

图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。

(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是___________________________________________________。

 

Answer 1

(1)耐热的DNA聚合  四种脱氧核苷酸

(2)Sma  Ⅰ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因  BamH  Ⅰ和Hind  Ⅲ  (3)脱分化  再分化

(4)抗盐基因(或目的基因)  将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中，观察该烟草植株的生长状态