人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生，具有抗凝血、防血栓的作用．研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ．请回答下列问题：（1）获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方法有两种

Question

人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生，具有抗凝血、防血栓的作用．研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ．请回答下列问题：
（1）获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方法有两种，一种是从人的___中获取该基因mRNA，逆转录成cDNA．另一种是PCR，根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列，设计2种特异性引物，从染色体DNA上获取并扩增人抗凝血酶Ⅲ基因．在PCR过程中，两个引物是___的结合位点，也是子链延伸的起点，dNTP（dATP、dCTP、dGTP、dTTP）在此过程中的作用是提供___．
（2）重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成，其中___决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达．
（3）山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞．在饲养层细胞上培养时，ES细胞具有___的特性．将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时，该表达载体进入ES细胞的方式为___．
（4）对山羊进行同期发情和超数排卵处理，得到代孕母羊和多个卵母细胞，当卵母细胞培养至___时，可去核并移入上述ES细胞的细胞核，完成核移植．为选择雌性胚胎，可在囊胚时取滋养层细胞做___分析用以鉴定性别．对于羊奶中是否含有人抗凝血酶Ⅲ，可用抗原-抗体杂交方法检测．

Answer 1

（1）通过反转录法获取目的基因时，由于抗凝血酶Ⅲ基因在肝细胞中选择性表达，因此需要从人的肝细胞中获取该基因mRNA，逆转录成cDNA．利用PCR技术扩增目的基因时，两个引物是Taq酶（耐高温DNA聚合酶）的结合位点，也...