脱分化的具体操作是怎样的?

Question

脱分化的具体操作是怎样的?

Answer 1

胡萝卜脱分化实验步骤
（一） 操作前用温水和肥皂将手充分擦洗干净,尽量做到不带菌.
（二） 将事先用自来水洗净的烟草茎,甘蓝花茎或胡萝卜贮藏根切成一定的大小（一般茎、要约为2厘米长、宽）
（三） 完成以上步骤后,又应用70%酒精棉花擦手,以便再行消毒.
（四） 用消毒镊子将根或茎的切段投放到装有70%酒精的大培养皿中浸泡30秒.
（五） 切段自酒精中取出后,立即浸泡于装有15%漂白粉精片水溶液的大培养皿中达20秒.
（六） 以上组织切段经分别装有无菌水I、II的铝饭盒各10分钟,进行漂洗,最后置于无菌水III中哒20分钟以上.
（七） 切段自无菌水中取出后,立即放于9厘米灭菌培养皿中,盖上盖,放于灭菌接种箱.
（八） 在灭菌箱中,无菌操作,削去植物茎,根的外部,叶子的边缘.
（九） 把正常部分切成3mm×3mm×1.5mm大小方块,叶组织切成1.5mm×1.5mm方块.
（十）由小镊子和接种针,在无菌条件下,将组织小块放入盛有脱分化培养基的三角烧瓶中,每瓶放5—6茎,根组织块或3—4块叶片组织块.挂上标签,写明日期,组号.
（十一）20℃—25℃避光培养3—4星期后观察.
（十二）烟草或甘蓝的花茎、长成的愈伤组织,可用同样的无菌操作方法,再接种到分化培养基础上,3—4星期再进行观察.
胡萝卜材料要经过液体培养基振荡培养才能分化