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怎样尽可能地洗干净镍柱?以前纯化蛋白用的镍柱想用来纯化另一个蛋白.之前用20%乙醇洗的,不知道够不够干净.请问有没有洗得更干净的办法?这样新蛋白才不会受影响.

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怎样尽可能地洗干净镍柱?
以前纯化蛋白用的镍柱想用来纯化另一个蛋白.之前用20%乙醇洗的,不知道够不够干净.请问有没有洗得更干净的办法?这样新蛋白才不会受影响.
▼优质解答
答案和解析
其实你只要在上一次纯化时使用的是500mM咪唑冲洗的话,这个浓度已经可以把镍柱上的标签蛋白全部洗脱了,之后再用几个柱体积的乙醇清洗一下杂质就足够干净了.
如果实在不放心,每次使用完成后,可以先用1-3个柱体积的0.5MNaOH冲洗一下,可以去除杂质,但时间不可过长,否则填料破坏导致流速非常缓慢.
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