实时荧光定量PCR（qPCR）实现了PCR从定性到定量的飞跃．TaqMan探针是qPCR技术中一种常用探针（如图1），其y末端连接荧光基团（R），3'末端连接淬灭剂（Q）．当探针完整时，R发出的荧光信号

Question

实时荧光定量PCR（qPCR）实现了PCR从定性到定量的飞跃．Taq Man探针是qPCR技术中一种常用探针（如图1），其y末端连接荧光基团（R），3'末端连接淬灭剂（Q）．当探针完整时，R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光．在qPCR扩增过程中，当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q，R发出的荧光信号被相应仪器检测到，荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步（如图2）．请回答下列问题：

（1）与质粒相比，Taq Man探针中除荧光基团、淬灭剂外，特有的化学成分是___．
（2）加入到PCR反应体系的物质，除图中所示引物、酶、模板DNA外，还应包括Mg²⁺、扩增缓冲液和___．
（3）根据TaqMan探针功能分析，探针中碱基序列的设计应主要依据___，同时要避免与___发生碱基互补配对．
（4）根据图2，Taq酶的功能有___、___．
（5）若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为a，加入的目的基因为b个，请根据图示过程，试用数学公式表示反应体系中荧光信号强度（Rn）与扩增次数（n）之间的关系：___．

Answer 1

（1）分析图解，Taq Man探针中含有碱基U，说明该探针为单链RNA，而质粒为小型环状DNA，因此与质粒相比，Taq Man探针中除荧光基团、淬灭剂外，特有的化学成分是核糖和尿嘧啶．（2）PCR技术的原理是DNA的双...