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A、B、C3种蛋白质的等电分别为9.0、8.0和4.0.将这3种蛋白质混合在一起,上到CM-SepharoseFastFlow阳高于交换柱上,采用0.05mo1/L柠檬酸缓冲液(pH5.0)平衡吸附.请问:在此条件下,哪种蛋白质不被吸

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A、B 、C 3种蛋白质的等电分别为 9.0、8.0和4.0.将这3种蛋白质混合在一起,上到CM-Sepharose Fast Flow阳高于交换柱上,采用0.05 mo1/L柠檬酸缓冲液(pH 5.0)平衡吸附.请问:在此条件下,哪种蛋白质不被吸附,被吸附的蛋白质哪种先被盐溶液( 1 mo1/L NaCl梯度)洗下来?为什么?
一个等电点在为pKa=7 的蛋白质可以在使用pH为9的缓冲液条件下结合到阳离子交换柱上吗?如果用pH为5.5的缓冲液呢?为什么?
▼优质解答
答案和解析
1.c不吸附,因为它带负电,cm也带负电,正电荷多的吸附牢固,所以b先被洗脱.
2.pH7时带负电,不吸附.pH 5.5带正电,可以吸附.