质粒提取,机器测得OD260/OD280=2.04,浓度780ug/mL,但是电泳检测没有条带第一次用一步法试剂盒提取质粒,提取之后,机器测得OD260/OD280=2.04,浓度780ug/mL,但是电泳检测没有条带.marker和对照的dna能检测

Question

质粒提取,机器测得OD260/OD280=2.04,浓度780ug/mL,但是电泳检测没有条带
第一次用一步法试剂盒提取质粒,提取之后,机器测得OD260/OD280=2.04,浓度780ug/mL,但是电泳检测没有条带.marker和对照的dna能检测出条带.

Answer 1

估计有很多种可能,我简单说几种,你看看能不能对上号
一、电泳检测时的上样液浓度太大,导致的DNA无法进入胶体中.
1、通常是loading buffer中水分挥发掉了浓度太大,点样的时候会被枪头带出来,或者就是浓度大使得DNA无法进入琼脂糖凝胶,换loading buffer,或者加水.
2、样品中混有太多蛋白等杂质,阻碍DNA进入点样孔等.
二、RNA太多将染料全部结合掉了,导致DNA无法与EB或者核酸染料结合而无法被检测出,这个您可以将跑好的胶再染一遍色,就是泡在EB或者核酸染料稀释后的TEB中.
三、都降解了,你只说OD260/OD280=2.04,这个可能是DNA、RNA、dNTP、ddNTP,只要是含有那个环形的磷酸戊糖结构就能产生这样的吸收效果.
四、其他原因太多了,建议你先看看是不是上述原因吧,不行您再追问.