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影响pcr反应效率的因素有哪些
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影响pcr反应效率的因素有哪些
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答案和解析
模板纯度,有较多蛋白或其他杂质时,会一定程度影响PCR效率;
模板量,过高的模板量反而会降低pcr效率和特异性;
引物,引物的长度需要再效率和特异性间获得优化,其次要控制引物GC含量;
聚合酶,要考虑酶的保真率和速度;
Mg离子浓度,Mg离子浓度过高会降低特异性,浓度过低会降低效率;
退火温度:退火温度低,效率会高,但特异性降低;退火温度高,效率降低,但特异性会提高;需优化.
我理解的就这么多,欢迎大家补充,纯属手打,
模板量,过高的模板量反而会降低pcr效率和特异性;
引物,引物的长度需要再效率和特异性间获得优化,其次要控制引物GC含量;
聚合酶,要考虑酶的保真率和速度;
Mg离子浓度,Mg离子浓度过高会降低特异性,浓度过低会降低效率;
退火温度:退火温度低,效率会高,但特异性降低;退火温度高,效率降低,但特异性会提高;需优化.
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