基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，如图中①-③示一种筛选方法的过程．pBR322质粒含有两个抗性基因，分别是Ampr（氨苄青霉素）抗性基因和Tetr（四环

Question

基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，如图中①-③示一种筛选方法的过程．pBR322质粒含有两个抗性基因，分别是Amp^r（氨苄青霉素）抗性基因和Tet^r（四环素）抗性基因，其中在Tet^r抗性基因上有下列目的基因的插入位点（插入将导致Tet^r抗性基因功能性失活），请回答：

（1）如图中①过程所需的酶除DNA连接酶以外，需要的限制酶是___．
（2）经过①过程，pBR322质粒可能出现的两种结果：A₁是___ A₂是___．
（3）经过导入过程，B（受体细菌）可能出现结果是___（多选）
A．导入未成功的细菌                   B．含A₁的细菌
C．含A₂的细菌                        D．含A₁和A₂的细菌
（4）②过程表示用含四环素（使细胞停止生长，但不致死）和环丝氨酸（使生长的细胞致死）的培养基中培养细菌甲，则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括___．
（5）若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D，则③过程需要做的处理是（请参照过程②的方法）___．

Answer 1

（1）①过程为构建基因表达载体，需要对质粒进行切割和与目的基因相连接，所以要用限制酶和DNA连接酶；据图分析可知，限制酶可选EcoRV  Sal1．（2）①为构建基因表达载体，会出现将目的基因与质粒成功重组和重组失...