（2014•海南模拟）已知SAPS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体．某研究小组为了研制预防SARS病毒的

Question

（2014•海南模拟）已知SAPS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体．某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作．其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是______．
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制鞋内切酶和______酶，后者的作用出是将限制性内切酶切割的______和______连接起来．
（3）如果省略步骤③而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能______，也不______．
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可______
______与______进行抗原一抗体特异性反应实验，从而得出结论．
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基序列______（相同、不同），根本原因是______．

Answer 1

（1）实验步骤①RNA控制DNA合成，该过程是逆转录．
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B，必须使用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，再用DNA连接酶，形成重组DNA．
（3）如果省略步骤②基因表达载体的构建，而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行复制，也不能进行以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）．
（4）步骤④检测所表达的S蛋白的特征，可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原-抗体特异性反应实验，如果能够特异性的结合，说明表达成功．
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表达蛋白质所用的目的基因相同．
故答案为：
（1）逆转录　
（2）DNA连接  　   目的基因          载体
（3）复制　以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白    　SARS康复病人血清　
（5）相同      　表达蛋白质所用的基因相同