家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．（1）进行转基因操作前，需用酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．（

Question

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用___酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的___和___之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法有___、___．
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因．PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、___和___．
（4）一般常采用法将干扰素基因导入家蚕的细胞．培养家蚕细胞时，经过和可得到大量的细胞；在培养过程中，家蚕细胞会表现出和特点．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以___，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

Answer 1

（1）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶处理动物组织，以便获得单个细胞．
（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因，其中启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录，可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻译，可采用抗原-抗体杂交法．
（3）采用PCR技术大量扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶（taq酶）和对干扰素基因特异性的DNA引物对．
（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
故答案为：
（1）胰蛋白（或胶原蛋白酶）
（2）启动子 终止子 分子杂交 抗原-抗体结合
（3）TaqDNA聚合酶 对干扰素基因特异性的DNA引物对
（4）增大细胞贴壁生长的附着面积