某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌

Question

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是___．
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用除了可以中和产生的乳酸以外，还可以___．分离纯化时应挑选出___的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为___个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是___．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的___．

Answer 1

（1）分离纯化乳酸菌时，首先要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落，因此需要对泡菜滤液进行梯度稀释．
（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为=（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10⁴个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．
故答案为：
（1）泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落（为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落）
（2）鉴别乳酸菌     具有透明圈
（3）3.8×10⁴
（4）平板划线法     甘油