回答有关微生物的问题急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，故检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施．（1）检验大肠杆菌的含

Question

回答有关微生物的问题
急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，故检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施．
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为______．下面4种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是______．

（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？______．原因是______．
（3）如分别取0.1mL已稀释10³倍的水样分别涂布到3个培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为______．
（4）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产气．现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？______．
（5）为进一步分离大肠杆菌，需将检测出大肠杆菌的发酵管转种在加入______的培养基中，培养一段时间，大肠杆菌菌落可呈现出______．
（6）手足口病的病原体是柯萨奇病毒．如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现．基于水样中病毒DNA极少，故可通过______技术（全称）增加病毒DNA片段，然后进行检测．

Answer 1

解析：（1）此方法属于菌落计数法中的稀释涂布平板法；分析题图A、B、C、D四个平板，前三个平板是采用的稀释涂布平板法，D是用平板划线法接种的．
（2）为了准确计数需设置对照组，以便确定培养基是否被杂菌污染，若被污染，则计数结果明显比实际多． 
（3）三个菌落的平均数=（55+56+57）/3=56，则每毫升样品中菌株数=56/0.1×10³=5.6×10⁵个，所以每升原水样中的菌株数=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸个．
（4）由于大肠杆菌发酵乳糖产酸产气，所以若观察到有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌．
（5）进一步分离和检测大肠杆菌，可以把发酵管中大肠杆菌接种在加入伊红美蓝的固体培养基上培养，大肠杆菌在加入伊红美蓝的固体培养基上生长形成有金属光泽的紫黑色菌落．
（6）体外对DNA片段进行扩增的方法是多聚酶链式反应扩增DNA片段技术（PCR技术）
故答案应为：
（1）（稀释）涂布平板法    　D
（2）需要设置（对照组）　     因为需要判定培养基是否被杂菌污染
（3）5.6×10⁸个
（4）通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37恒温箱培养24 h．若试管内有气泡生成说明水样中有大肠杆菌．
（5）伊红美蓝和琼脂   有金属光泽的紫黑色
（6）多聚酶链式反应扩增DNA片段