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肺细胞中的lf4一右基因表达减弱,癌基因nAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将lf4一右基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术
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肺细胞中的lf4一右基因表达减弱,癌基因nAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将lf4一右基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图1.

(1)进行过程①时,需用______酶切开载体以插入lf4一右基因.进行过程②时,需用______酶处理贴附在培养皿壁u的细胞,以利于细胞培养.采用PCn技术扩增lf4一右基因时,在PCn反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论u为______.
(2)研究发现,lf4一右基因能影响癌基因nAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞中提取______进行分子杂交,以直接检测1f4一右基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中______(nASmnNA/nAS蛋白质)含量减少引起的.
(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为______.
(4)某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(一b为千五碱基对):
可以推知限制酶HindⅢ和Sma I在此DNA分子中分别有______五识别序列.两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶fcon I处理,结果导致凝胶u3.0一b的片段消失,产生一种1.5一b的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和fcon I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为______的片段.

(1)进行过程①时,需用______酶切开载体以插入lf4一右基因.进行过程②时,需用______酶处理贴附在培养皿壁u的细胞,以利于细胞培养.采用PCn技术扩增lf4一右基因时,在PCn反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论u为______.
(2)研究发现,lf4一右基因能影响癌基因nAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞中提取______进行分子杂交,以直接检测1f4一右基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中______(nASmnNA/nAS蛋白质)含量减少引起的.
(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为______.
(4)某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(一b为千五碱基对):
限制酶 | 片段及长度 |
HindⅢ | 2.5一b,5.0一b |
Sma I | 2.0一b,5.5一b |
Hind 1Ⅲ和Sma I | 2.5一b,3.0一b,2.0一b |
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答案和解析
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