绿色荧光蛋白GFP能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国

Question

绿色荧光蛋白 GFP 能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助 GFP 发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（ GFP ）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（ 1 ）若限制酶 Ⅰ 的识别序列和切点是 —G ^↓ GATCC— ，限制酶 Ⅱ 的识别序列和切点是 — ^↓ GATC— ，在质粒上有酶 Ⅰ 的一个切点，在目的基因的两侧各有 1 个酶 Ⅱ 的切点，在 DNA 连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 __________ ，理由是： ___________________________________________ 。

（ 2 ）过程 ③ 将重组质粒 导入 猪胎儿成纤维细胞 时，采用最多的方法是 ______________________ 。

（ 3 ）获得转基因猪的关键步骤是 _____ （填序号）， GFP 基因的作用是作为 _______ 。抑制小猪抗原表达的基因要插入到启动子和 _________ 之间。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是可以避免     _____________________ 。

（ 4 ）目前科学家们通过 蛋白质 工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： _____________________ （用数字表示）。

① 推测 蓝色荧光蛋白的 氨基酸序列和基因的核苷酸

② 蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计 序列

③ 蓝色荧光蛋白基因的 修饰（合成）   

④ 表达出 蓝色荧光蛋白。

Answer 1

（ 1 ）可以连接 (1 分 ) 因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） （ 2 ）显微注射技术 （ 3 ） ②      作为标记基因  ...