（2014•闵行区一模）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病．对炭疽病疑似患者，可通过噬菌体裂解实验确诊．细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落．（1）

Question

（2014•闵行区一模）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病．对炭疽病疑似患者，可通过噬菌体裂解实验确诊．
细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落．
（1）采集疑似患者的样本进行分离培养时，需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基．下列有关操作方法正确的是______（多选）．
A．操作顺序为计算、称量、熔解、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置
（2）通过平板划线法获得可疑菌落，图1是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④⑤．下列操作方法正确的是______．
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在⑤区域中才可以得到所需菌落
D．在①②③④⑤区域中划线前后都要对接种环灭菌
细菌鉴定：实验流程如图2所示．
（3）实验过程中，对配制的液体培养基的灭菌具体要求是______．
（4）在实验Ⅳ中，先用无菌滴管吸取______滴于平板培养基表面，再用______涂匀，经培养得到如图中Ⅳ的6个菌落．然后在平板培养基的______（填数字标号）菌落上滴加______．观察并记录结果．

Answer 1

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；待平板冷却凝固约5～10...