螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察请回答：

Question

螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察
请回答：
（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现___色环带．
（2）步骤X表示___．在此之前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是___．将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为59、58和57，据此可得出每升水样中的活菌数为___．
（3）在培养时，需将培养皿倒置并放在___中．若不倒置培养，可能导致___．
（4）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的___分解为NH₃和¹⁴CO₂．

Answer 1

（1）由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，指示剂变红．
（2）在实验操作过程中要先灭菌、倒平板，再进行接种．在接种之前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，用以检测培养基平板灭菌是否合格．将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为59、58和57，据此可得出每升水样中的活菌数=（59+58+57）÷3÷0.1×100×1000=5.8×10⁷．
（3）培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养，倒置培养的目的也是为了获得单一菌落．
（4）如果人体感染了Hp，能将尿素分解为NH₃和CO₂，因而标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp．
故答案为：
（1）红　
（2）接种　检测培养基平板灭菌是否合格　　 5.8×10⁷
（3）恒温培养箱　无法形成单个菌落
（4）尿素