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雌性荧火虫尾部的提取液中含有荧光素和荧光素酶(称为荧光素酶系溶液),该酶能利用ATP能量,催化荧光素与氧气反应形成能发出特定荧光的氧化型荧光素,荧光强度与反应体系中的ATP量
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雌性荧火虫尾部的提取液中含有荧光素和荧光素酶(称为荧光素酶系溶液),该酶能利用ATP能量,催化荧光素与氧气反应形成能发出特定荧光的氧化型荧光素,荧光强度与反应体系中的ATP量成正比,利用该原理可测量不同萌发阶段种子样液中.ATP的含量,实验方法如下:
(1)比色杯(容器)中分别加人浓度为1×10-7 M、1×10-8 M、1×10-9 M、1×10-10 M、1×10-11M的ATP溶液0.2ml,向各比色杯中加人0.8ml荧光素酶系溶液,混匀后立即用分光光度计测量各比色杯发光强度,实验设定的温度为25℃,pH为7.4-7.8.以坐标图形式绘出ATP浓度与发光强度关系曲线.
(2)将未萌发、萌发12小时、萌发24小时的玉米胚各10粒,70℃高温处理后,经研磨、提取,获得组织样液.利用荧光素酶系溶液测定荧光强度,从(1)所绘出的曲线中查出相应ATP浓度值.回答下列问题:
填写表格:① ___ ② ___ ③ ___
步骤(2)中设定的温度与pH值应是 ___,玉米胚组织样液中的ATP主要来自细胞的 ___(生理过程),萌发24小时后玉米种子该过程增强,但样液发光强度并无成正比增强,解释原因: ___.
(1)比色杯(容器)中分别加人浓度为1×10-7 M、1×10-8 M、1×10-9 M、1×10-10 M、1×10-11M的ATP溶液0.2ml,向各比色杯中加人0.8ml荧光素酶系溶液,混匀后立即用分光光度计测量各比色杯发光强度,实验设定的温度为25℃,pH为7.4-7.8.以坐标图形式绘出ATP浓度与发光强度关系曲线.
(2)将未萌发、萌发12小时、萌发24小时的玉米胚各10粒,70℃高温处理后,经研磨、提取,获得组织样液.利用荧光素酶系溶液测定荧光强度,从(1)所绘出的曲线中查出相应ATP浓度值.回答下列问题:
① | ② | ③ | |
1组 | 0.2ml | 0.8ml | ___ |
2组 | 0.2ml | 0.8ml | ___ |
3组 | 0.2ml | 0.8ml | ___ |
步骤(2)中设定的温度与pH值应是 ___,玉米胚组织样液中的ATP主要来自细胞的 ___(生理过程),萌发24小时后玉米种子该过程增强,但样液发光强度并无成正比增强,解释原因: ___.
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答案和解析
据题干可知,①加入等量的不同胚组织样液 ②加入等量的荧光素酶系溶液 ③观察各组的荧光强度步骤(2)中设定的温度与pH值应为最适温度和最适PH值,即25℃,7.4~7.8,玉米胚组织样液中的ATP主要来自细胞的细胞呼...
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