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如图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识,将下面操作程序补充完整.(1)构建基因表达载体:在构建基因表达载体时常要用到工具酶.

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如图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识,将下面操作程序补充完整.

(1)构建基因表达载体:在构建基因表达载体时常要用到工具酶.常用的DNA连接酶有______和______,后者也可以用于平末端的连接.如果目的基因要在乳腺细胞中表达,基因表达载体构建时要将目的基因与______、标记基因和终止子等组件重组在一起,载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于______.
(2)获得足够数量的受精卵:为了获得足够数量的受精卵,先利用______刺激供体雌性鼠超数排卵,然后从______冲取______,再完成体外受精.
(3)将目的基因导入细胞:确定目的基因是否整合到染色体上,一般需用______做探针,与转基因小鼠细胞中提取的______进行DNA分子杂交.
(4)早期胚胎培养:早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需要添加______、______,氨基酸、核苷酸等营养成分,以及动物血清等物质.当胚胎培养到适宜的阶段时,可进行胚胎移植.
(5)胚胎移植:在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行______处理.移植后,还要对受体雌鼠进行______检查.
(6)胚胎干细胞形态上具有______的特性,它在添加______的培养液中可以维持不分化的状态.
▼优质解答
答案和解析
(1)在构建基因表达载体时,常用的DNA连接酶有E•coliDNA连接酶(大肠杆菌DNA连接酶)、T4-DNA连接酶,二者均可以连接粘性末端,其中T4-DNA连接酶还可以连接平末端;如果目的基因要在乳腺细胞中表达,需将目的基因...
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