请问DMEM/F12培养液配制怎么具体配置?

Question

请问 DMEM/F12培养液配制 怎么具体配置?

Answer 1

DMEM/F12培养基说明书
产品代号：MD207-050
一．【组成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042
五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1
七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081
氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55
氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035
无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24
氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98
无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65
磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02
L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2
L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031
L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219
甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17
L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【产品指标】

外观 粉红色固体粉末
溶解性 完全溶解,溶液澄明.
pH值
①加NaHCO3 6.60～7.20
②不加NaHCO3 5.50～6.10
水分（%） ≤5.0
渗透压（mOsm/kgH2O）
①加NaHCO3 274～302
②不加NaHCO3 238～263
细菌内毒素（EU/ml） ≤10
微生物检查（CFU/g） ≤1000
细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似

细胞数量 加10％小牛血清培养4天,细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml.
三.【配制方法】
⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水将袋内残留培养基洗下,并入容器.加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升,轻微搅拌溶解.
⑵ 加入2.438克碳酸氢钠.
⑶ 轻微搅拌溶解,加注射用水至1升.
⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值.
⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌.
⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存.
四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏,干燥、密封、避光贮藏.