屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗．研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿．（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的为模板，

Question

屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗．研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿．
（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的___为模板，通过___（方法）建立，该文库中的基因___（填“含有”或“不含有”）启动子．
（2）基因工程操作的核心步骤是___．若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择___进行连接．
（3）目的基因的大量扩增可以采用___技术，该技术的原理是___，该技术中需使用一种特殊的酶是___．

Answer 1

（1）cDNA文库是以mRNA为模板，通过反转录法建立的；由于启动子和终止子不能转录形成mRNA，因此以mRNA为模板逆转录形成的cDNA中不含有启动子、终止子等结构．
（2）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建；根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（3）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制．PCR在较高温度下进行，因此该技术中需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）．
故答案为：
（1）mRNA    反转录    不含有
（2）基因表达载体的构建      T₄DNA连接酶
（3）PCR        DNA（双链）复制    热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）