金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病．金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．如图

Question

金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病．金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题．

（1）操作中在血平板上的接种方法是______，接种操作前后需要对接种工具进行______灭菌．
（2）用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______．
（3）在制备血平板时需将pH调节至______（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基______后，再加入适量血液．按培养基功能分类，血平板属于______培养基．
（4）多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，需要对本次操作进行完善，完善的方案是______．
（5）为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B______．为方便后续使用该菌种，可将菌液用______的方法长期保存．

Answer 1

（1）使用接种环进行接种应该只用平板划线法；接种工具灭菌的方式是灼烧灭菌．
（2）用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是分离出金黄色葡萄球菌．
（3）血液是碱性的，所以培养基应该调至碱性；灭菌法方法是高压蒸汽灭菌法，所以应该等到培养基冷却后加入血液，否则会破坏血细胞；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基．
（4）根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；但这个实验要这是对照实验，对照实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶．
（5）对相应抗生素敏感的细菌，在含有抗生素的培养基上不能生长；反之，则能生长．含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；菌种长期保存，用甘油管藏的方法．
故答案为：（1）平板划线法      灼烧    
（2）分离出金黄色葡萄球菌
（3）微碱性   冷却     鉴别
（4）周围存在透明圈    设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组
（5）敏感  不敏感  甘油管藏