出自2002年复旦生命科学院入学考试为确定某一短肽的氨基酸序列,进行了一系列的实验,得到以下数据:（1）酸水解,得到氨基酸组成为（Tyr,2Asp,Lys,Met）；（2）胰蛋白酶,得到两个片段在中性pH

Question

出自2002年复旦生命科学院入学考试
为确定某一短肽的氨基酸序列,进行了一系列的实验,得到以下数据:
（1）酸水解,得到氨基酸组成为（Tyr,2Asp,Lys,Met）；
（2）胰蛋白酶,得到两个片段在中性pH溶液中均现电荷中性；
（3）用CNBr处理,并未发现有任何反应.
（4）酸水解后测得两个氨基酸组成为（Asp,Tyr,Lys）和（Met,Asp）；紫外扫描发现,组成为（Met,Asp）的肽段在280nm处有特征吸收.
（5）FDNB试剂反应后,满载薄层层析上得到DNP-Tyr的斑点.
试决定该短肽的氨基酸序列

Answer 1

步骤1确定组成,但是酸水解会使Asn水解成Asp.
步骤2确定两个肽段都不带电荷,但是1中分析结果中Lys带正电荷,Asp带负电荷,其他不带电荷.另外胰蛋白酶裂解的是Lys的C端肽键.
步骤3 说明Met在肽段中具有游离的-COOH,只有这样溴化氰才不能裂解肽段.也说明Met是C端氨基酸.
步骤4看不明白.“两个氨基酸组成”?如果有280nm吸收的话,那么肯定是存在有芳香环的氨基酸Tyr.
步骤5确定N端氨基酸为Tyr.