我国科学家屠呦呦及其团队从青蒿中分离出青蒿素用于疟疾的治疗，这一措施至今挽救了全球数百万人的生命．青蒿中青蒿素的含量很低，科研工作者一直致力于提高青蒿素含量的研究．某

Question

我国科学家屠呦呦及其团队从青蒿中分离出青蒿素用于疟疾的治疗，这一措施至今挽救了全球数百万人的生命．青蒿中青蒿素的含量很低，科研工作者一直致力于提高青蒿素含量的研究．某研究小组给青蒿转入青蒿素合成的关键基因fps，通过该基因的过量表达来提高青蒿素的产量．请回答相关问题．

（1）提取青蒿的总RNA，在___酶作用下获得青蒿的cDNA．
（2）根据基因fps的编码序列设计___，通过___得到目的基因，然后构建含有fps基因的表达载体．为了便于筛选，表达载体中应含有___．
（3）将表达载体导入农杆菌细胞中，用此农杆菌侵染无菌青蒿苗叶片，培养侵染后的叶片获得幼苗．培养过程中细胞发生的主要变化是___和___．
（4）将获得的22株生长健壮的转基因青蒿苗移栽到大田里，待其生长到现蕾期后收获植株地上部分，测定青蒿素的含量，得到的结果如图所示：
测定结果显示，转基因青蒿植株中青蒿素含量最多约是对照组的___倍．不同植株中青蒿素的含量___，这可能是由于T-DNA整合到青蒿基因组的不同位置，使外源基因的___引起的．

Answer 1

（1）提取上述提取青蒿的总RNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA．
（2）根据基因fps的编码序列设计引物，通过PCR扩增技术得到目的基因，然后构建含有fps基因的表达载体．为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，在表达载体上含有标记基因．
（3）离体叶片获得幼苗，必须通过植物的组织培养技术培养成再生植株，该过程需要要经过脱分化和再分化，即培养过程中细胞发生的主要变化是细胞分裂和细胞分化．
（4）据图分析，对照组青蒿素含量为5mg/千克，第22株转基因青蒿苗中青蒿素含量最多，为10mg/千克左右，大约是对照组的2倍．由图可知，不同植株中青蒿素的含量不同，这可能是由于T-DNA整合到青蒿基因组的不同位置，使外源基因的选择性表达的结果引起的．
故答案为：
（1）逆转录
（2）特定的引物对   PCR    标记基因
（3）细胞分裂   细胞分化
（4）2    有很大差异    表达效率不同