肿瘤的生长依赖于新生血管，血管内皮生长因子（VEGF）是目前公认最关键的促血管形成因子．为研究促性腺激素释放激素（GnRH）类似物（药物甲）、“顺铂”（一种化疗药物乙）及其联合

Question

肿瘤的生长依赖于新生血管，血管内皮生长因子（VEGF）是目前公认最关键的促血管形成因子．为研究促性腺激素释放激素（GnRH）类似物（药物甲）、“顺铂”（一种化疗药物乙）及其联合作用对卵巢癌动物血管生成的影响，研究人员以卵巢癌细胞为研究对象，检测细胞中血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质的含量．
材料：3mg/L顺铂、10^-7mol/LGnRH类似物、胰蛋白酶、12孔细胞培养板（每个孔可进行细胞培养）、卵巢癌细胞、细胞培养液、C0₂培养箱
（要求与说明：不考虑加入顺铂和GnRH类似物对体积的影响；VEGF的mRNA和蛋白质含量的具体检測步骤不要求；实验条件适宜）
（1）实验思路（其中药物加入设计画在下面的12孔细胞培养板示意图中即可，无需再文字说明；药物可用甲、乙表示；药物作用3天，每24h检测一次，无需前测；重复实验不要求）
___
（2）若GnRH类似物、顺铂都能抑制血管生成，且联合作用效果更佳．请画出药物作用48h时血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量的柱形图．___．
（3）实验分析：
①促性腺激素释放激素由___产生．
②如果已得到上述第（2）小题中的实验结果，为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步你将选用身体状况一致的___动物，随机均分后，分组进行药物处理，观察___．

Answer 1

（1）根据实验目的，该实验的目的是研究促性腺激素释放激素（GnRH）类似物（药物甲）、“顺铂”（一种化疗药物乙）及其联合作用对卵巢癌动物血管生成的影响，该实验设置四组：空白对照组；一组添加药物甲，一组添加药物乙；还有一组添加药物甲和药物乙，因变量是血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量，（实验要求药物作用3天，每24h检测一次）
实验思路：
①取等量的卵巢癌细胞和细胞培养液加入到12孔板细胞培养板中培养．实验处理及检测时间如图所示：

②将12孔细胞培养板置于C0₂培养箱中培养，每24h取对应组细胞用胰蛋白酶处理，吸取细胞检测其mRNA和蛋白质的含量，并记录．
③分析统计实验数据．
（2）①促性腺激素释放激素由下丘脑产生．
②本实验以卵巢癌细胞为研究对象，如果已得到上述第（2）小题中的实验结果，为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步你将选用身体状况一致的患卵巢癌动物，随机均分后，分组进行药物处理，观察血管生成的长度或条数．
故答案为：
（1）实验思路：
①取等量的卵巢癌细胞和细胞培养液加入到12孔板细胞培养板中培养．

②将12孔细胞培养板置于C0₂培养箱中培养，每24h取对应组细胞用胰蛋白酶处理，吸取细胞检测其mRNA和蛋白质的含量，并记录．
③分析统计实验数据．
（2）

要求GnRH类似物组（甲）和顺铂组（乙）低于空白对照组，联合作用组（甲+乙）最低，GnRH类似物组（甲）和顺铂组（乙）高低比较不要求，mRNA和蛋白质相对含量的高低比较也不做要求．
（3）实验分析
①下丘脑
②患卵巢癌       血管生成的长度或条数