（2014•日照二模）如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图同答：（1）分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的，最终获得的绿色荧

Question

（2014•日照二模）如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图同答：

（1）分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的______，最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于______．
（2）图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为______，常用的方法是______．
（3）图示中，作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在______期，常通过______（物理方法）进行激活，使其完成减数分裂和发育进程．
（4）培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为______培养基．通常在培养基中还需要加入适量的______等天然成分．
（5）图示重组细胞培养至一定阶段可通过______方法，从而一次获得多个转基因猪．过程⑧的实质是______．

Answer 1

（1）图中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段，获取绿色荧光蛋白基因，并不能破坏目的基因．限制酶切割产生的DNA片段末端不平整，即末端为黏性末端．
（2）转化是指将目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程．如图示将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程．因受体细胞为动物细胞，常用的方法是显微注射法．
（3）受体细胞常选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质．一般取处在MⅡ中（减数第二次分裂中）期的去核卵母细胞作为受体细胞的，通过电脉冲（或电刺激）进行激活，使其完成减数分裂和发育进程．
（4）培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基．动物细胞所需的营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．通常在培养基中还需要加入适量的血清（或血浆）等天然成分．
（5）胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割，经移植获得同卵双胚或多胚，从而获得较多基因型相同的转基因猪．图示重组细胞培养至桑椹胚或囊胚，可通过胚胎分割、胚胎移植方法，从而一次获得多个转基因猪．过程⑧是胚胎移植过程，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移．
故答案为：
（1）PstⅠ和EcoRⅠ黏性末端
（2）转化                        显微注射法
（3）MⅡ中（减数第二次分裂中）     电脉冲（或电刺激）
（4）合成                        血清（或血浆）
（5）胚胎分割、胚胎移植     早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移