在使蛋白质沉淀中,加入可与蛋白质合成的不溶性化合物是,溶液中关于pH值相对于等电点的高低是怎么回事?

Question

在使蛋白质沉淀中,加入可与蛋白质合成的不溶性化合物是,溶液中关于pH值相对于等电点的高低是怎么回事?

Answer 1

从概念入手：由于蛋白质表面离子化侧链的存在,蛋白质带净电荷.由于这些侧链都是可以滴定的（titratable）,对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点.
换句话说,等电点就是蛋白质分子处于电荷平衡时,该蛋白质溶液的PH值.在等电点时,蛋白质分子以双极离子存在,总净电荷为零,颗粒无电荷间的排斥作用,易凝集成大颗粒,因而最不稳定,溶解度最小,易沉淀析出.
在等电点外的所有其他pH值,依据蛋白质所带净电荷采用电泳和离子交换层析来分离和分离纯化该蛋白质.
但是：
某一蛋白质的pI大小是特定的,与该蛋白质结构有关,而与环境pH无关.
在某一pH溶液中当pH＞pI时该蛋白质带负电荷.反之pH＜pI时该蛋白质带正电荷.pH=pI时该蛋白质不带电荷.
能让蛋白质沉淀的物质很多,非变性沉淀试剂主要有机溶剂、盐溶液等,主要是破坏其电荷平衡和水化膜,从而使其聚集沉淀,这不涉及蛋白质变性.