大肠杆菌常在生物技术上被制成“工程菌”．某小组的同学，利用实验室的大肠杆菌的品系及其他必要材料，对该品系大肠杆菌进行了培养、计数．请分析回答：（1）微生物的培养基在制备

Question

大肠杆菌常在生物技术上被制成“工程菌”．某小组的同学，利用实验室的大肠杆菌的品系及其他必要材料，对该品系大肠杆菌进行了培养、计数．请分析回答：
（1）微生物的培养基在制备时防止杂菌污染，常用的无菌技术包括______ 两个方法．
（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，甲同学将平板倒置．他这样做的目的是______．
（3）乙同学采用平板划线的方法接种，获得单菌落后继续筛选，在每次划线之前都要灼
烧接种环，他这样做的目的是______．
（4）丙、丁2位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数．在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下2种统计结果：丙同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230；丁同学在该浓度下涂布了3个平板统计的菌落数分别为21、212、256，并且取平均值163作为统计结果；请评价这两位同学的实验结果的有效性．①丙同学______，原因是______．②丁同学______，原因是______．
（5）戊同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，但他无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．他的理由是什么？______．

Answer 1

（1）常用的无菌技术包括消毒和灭菌两个方法．
（2）培养基倒置培养是为了防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发，造成污染．
（3）在每次划线之前都要灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，以便从上次划线获取菌种．
（4）丙同学实验操作不合理，原因是只没有设置重复组，结果不具有说服力；丁同学也不合理，应选择30-300的菌落数进行计数，其中1个计数结果与另2个相差太远．
（5）在培养基上还有其他杂菌的菌落，由于杂菌可能来自培养基或来自培养过程，故无法断定该大肠杆菌的品系被污染了．
故答案为：
（1）消毒和灭菌
（2）皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，可防止培养基表面的水分挥发
（3）杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
（4）①不合理；没有设置重复组，结果不具有说服力    ②不合理； 1个计数结果与另2个相差太远（或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值）
（5）因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程