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怎样算某蛋白的在重组菌中的表达量?做蛋白纯化,想算纯化的回收率的···纯化后的蛋白浓度可以算,但是纯化前的怎么算啊?这细菌表达那么一大堆,我怎么算我的目的蛋白的表达量啊?急用急
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怎样算某蛋白的在重组菌中的表达量?
做蛋白纯化,想算纯化的回收率的···纯化后的蛋白浓度可以算,但是纯化前的怎么算啊?这细菌表达那么一大堆,我怎么算我的目的蛋白的表达量啊?急用急用,狂谢狂谢···\x09拜托各位大神
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▼优质解答
答案和解析
做个IPTG诱导前后的对比,跑SDS PAGE胶.用同等OD同等体积的菌液收集细胞裂解做样品,染色后看条带浓度,然后做一系列浓度梯度.旁边跑一个已知浓度的蛋白,比如BSA.这样可以确定在哪一个数量级.或者可以再跑一块胶,不染色,把对应位置的给切下来,液氮冻完磨碎重新溶解,去测浓度.
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